איך בוחרים שיבוטים?

2024 מְחַבֵּר: Stanley Ellington | [email protected]. שונה לאחרונה: 2023-12-16 00:17

מתי בְּחִירָה א שיבוט , הקפידו שהשורשים חזקים, לבנים ובולטים בשקיקה ממצע הגידול. אם השורשים חומים ומצומקים, או נראים לא פעילים בדרך אחרת, החזירו אותם וחפשו שורש טוב יותר.

חוץ מזה, איך משכפלים תא בודד?

1. ספור את התאים כדי להכניס ~ 16, 000 תאים לתוך הבאר הראשונה (A1) של צלחת 96 באר המכילה 200 μL של מדיום.
2. הסר 100 μL מתאים המכילים A1 וערבבו עם B1, פיפטינג למעלה ולמטה פי 3 כדי לערבב היטב לפני הסרת 100 μL וערבוב עם C1 וכו'.

כמו כן, איך בוחרים מושבת תאי יונק? הנח את הצלחת מתחת למיקרוסקופ כדי לבחור בריא לא מובחן מושבות . בחר מושבות באמצעות פיפטה P-20 מוגדרת ל-10ul. בקפידה לִבחוֹר א מוֹשָׁבָה מבלי לפרק את מוֹשָׁבָה לתוך יחיד תאים , ומעבירים אותו לצלחת בעלת 96 בורות עם טריפסין. בצע פיפטה למעלה ולמטה כמה פעמים כדי לפזר את מוֹשָׁבָה.

בהתאם, איך משתמשים בגליל שיבוט?

באמצעות מלקחיים בינוניים סטריליים, להרים א גליל שיבוט . לחץ בעדינות על התחתית השטוחה של צִילִינדֶר לתוך שומן הסיליקון החלק ולהסיר בתנועה אנכית פתאומית. אם נעשה כראוי, זה ייתן פיזור אחיד של שומן על החלק התחתון של צִילִינדֶר . הגדר את צִילִינדֶר מעל מושבה.

איך בוחרים מושבות לשורות תאים יציבות?

הפרוטוקול ליצירת קווי תאים יציבים דורש מספר שלבים כפי שמוצג להלן:

1. צור עקומת הרג כדי לקבוע את ריכוז הבחירה האופטימלי של אנטיביוטיקה.
2. להמיר תאים עם מבנה פלסמיד רצוי
3. בחר והרחיב מושבות פוליקונליות יציבות.
4. זיהוי שיבוטים בודדים על ידי דילול והרחבה מוגבלים.