תוכן עניינים:

איך מחדירים גן לפלסמיד?
איך מחדירים גן לפלסמיד?

וִידֵאוֹ: איך מחדירים גן לפלסמיד?

וִידֵאוֹ: איך מחדירים גן לפלסמיד?
וִידֵאוֹ: HW5 inserting genes into plasmids 2024, נוֹבֶמבֶּר
Anonim

השלבים הבסיסיים הם:

  1. חתוך לפתוח את פלסמיד ו"הדבק" ב- גֵן . תהליך זה מסתמך על אנזימי הגבלה (שחותכים DNA) ו-DNA ליגאז (המצטרפת ל-DNA).
  2. לְהַכנִיס ה פלסמיד לתוך בַּקטֶרִיָה.
  3. תתבגר המון פלסמיד -נושא חיידקים ולהשתמש בהם כ"מפעלים" לייצור החלבון.

כמו כן, כיצד ניתן להחדיר גן לתוך פלסמיד GCSE?

זה מוכנס לתוך פלסמיד שימוש באנזימי ליגאז. ה פלסמיד הולך לְתוֹך תא חיידקי. החיידק הטרנסגני מתרבה, וכתוצאה מכך ב מיליוני חיידקים זהים המייצרים אינסולין אנושי.

בנוסף, איך עושים תת-שיבוט של גן? שלבים בסיסיים עבור תת שיבוט אתה משחרר ומטהר את התוספת שלך מהוקטור האב, קושר את התוספת הזו לוקטור יעד מוכן, הופך את תגובת הקשירה הזו לתאי חיידקים מוכשרים. לאחר מכן אתה מסנן את התאים שעברו טרנספורמציה עבור ההוספה.

אם ניקח זאת בחשבון, מהם 4 השלבים של שיבוט גנים?

בפרוטוקולי שיבוט של אנזימי ההגבלה הקלאסי של עיכול וקשירה, שיבוט של כל קטע DNA כולל בעיקרו ארבעה שלבים:

  • בידוד של ה-DNA המעניין (או ה-DNA המטרה),
  • קשירה,
  • טרנספקציה (או טרנספורמציה), ו.
  • הליך מיון/בחירה.

איך מגבירים פלסמיד?

הליך ניסיוני

  1. הפעל PCR וטהר את מוצר ה-PCR: הפעל PCR כדי להגביר את ה-DNA הכנס שלך.
  2. עכל את ה-DNA שלך:
  3. בודדים את התוסף והווקטור על ידי טיהור ג'ל:
  4. קשר את התוספת שלך לתוך הווקטור שלך:
  5. טרנספורמציה:
  6. בודדים את הפלסמיד המוגמר:
  7. אמת את הפלסמיד שלך על ידי רצף:

מוּמלָץ: