למה משמש PCR שעתוק הפוך?

2024 מְחַבֵּר: Stanley Ellington | [email protected]. שונה לאחרונה: 2023-12-16 00:17

RT - PCR ( Reverse Transcriptase PCR ) RT - PCR הוא בשימוש במעבדות מחקר לחקר ביטוי גנים, למשל בניסויים להבחין בין אקסונים לאינטרונים, ויכולים להיות בשימוש קלינית לאבחון מחלות גנטיות ולנטר טיפול תרופתי.

בהתחשב בכך, מה דרוש עבור תמלול הפוך?

ליזום תעתיק הפוך , לַהֲפוֹך טרנסקריפטאזות דורשות אוליגונוקלאוטיד DNA קצר הנקרא פריימר כדי להיקשר לרצפים המשלימים שלו על תבנית ה-RNA ולשמש נקודת מוצא לסינתזה של גדיל חדש.

יתר על כן, מדוע חשוב להשתמש ב-cDNA עבור PCR? cDNA יש משלה מַשְׁמָעוּת ב תגובת שרשרת פולימראז ( PCR ) טכניקה. cDNA הוא תוצאה של שעתוק הפוך על ידי אנזימים הנקראים תעתיקים הפוכים. עכשיו, בהיותו עותק מדויק של DNA גנומי , זה cDNA יכול לשרת את מַטָרָה של התבנית DNA להגברה במבחנה וניתוחים הבאים.

בדרך זו, מה ההבדל בין PCR בזמן אמת ל-PCR הפוך של transcriptase?

RT - PCR משמש להגברת השעתוק ההפוך של קוד ה-DNA; QPCR מודד את ההגברה. 3. RT - PCR מיועד להגברה, בעוד ש-qPCR מיועד לכימות.

האם cDNA תקוע כפול?

שלא כמו RNA, ניתן לשכפל מולקולות DNA בקלות (אלה נקראות ' cDNA clones') על ידי יצירת ה cDNA כפול - נָטוּשׁ וקשור ל-DNA וקטור. ניתוח רצף של DNA הוא הרבה יותר קל מזה של RNA, ולכן, cDNA היא הצורה החיונית בניתוח RNA, במיוחד של mRNA אוקריוטי.