איך עובד שיבוט גיבסון?

2024 מְחַבֵּר: Stanley Ellington | [email protected]. שונה לאחרונה: 2023-12-16 00:17

ה שיבוט גיבסון מאסטר מיקס מורכב משלושה אנזימים שונים בתוך חיץ אחד. לכל אנזים יש תפקיד ספציפי וייחודי לתגובה: T5 Exonuclease - יוצר גדילי DNA חד-גדילי 3' על ידי לעיסה חזרה מקצה ה-DNA 5'. שברי DNA משלימים יכולים לאחר מכן להסתגל זה לזה.

בהתחשב בזה, איך גיבסון עובד?

ה גיבסון שיטת Assembly® היא הליך שיבוט המאפשר שיבוט של שני פרגמנטים או יותר ללא צורך בעיכול אנזים מוגבל או אתרי הגבלה תואמים. במקום זאת, קצוות חופפים המוגדרים על ידי המשתמש משולבים לתוך השברים כדי לאפשר חיבור חלק של שברים סמוכים.

באופן דומה, מה יש ב-Gibson Assembly Master Mix? ה Gibson Cloning Master Mix מורכב משלושה אנזימים שונים בתוך חיץ אחד. לכל אנזים יש תפקיד ספציפי וייחודי לתגובה: T5 Exonuclease - יוצר גדילי DNA חד-גדילי 3' על ידי לעיסה חזרה מקצה ה-DNA 5'. שברי DNA משלימים יכולים לאחר מכן להסתגל זה לזה.

באופן זה, איך עובדת הרכבה של שער הזהב?

שער הזהב שיבוט או אספת שער הזהב היא שיטת שיבוט מולקולרית המאפשרת לחוקר להרכיב בו-זמנית וכיוונית מספר רב של קטעי DNA למקשה אחת באמצעות אנזימים מגבילים מסוג IIs ו-T4 DNA ligase. זֶה הרכבה היא מבוצע במבחנה.

איך עובד שיבוט Gateway?

ה שיבוט של GATEWAY הטכנולוגיה מבוססת על מערכת הרקומבינציה הספציפית לאתר המשמשת פאג l כדי לשלב את ה-DNA שלו ב-E. אתרי attL ו-attR המקיפים את ה-DNA הפאג המוכנס מתחברים מחדש באופן ספציפי לאתר במהלך אירוע הכריתה כדי לשנות את אתר attP בפאג l וב- אתר attB ב-E.