האם אתה יכול לרצף תוצר PCR?

2025 מְחַבֵּר: Stanley Ellington | [email protected]. שונה לאחרונה: 2025-01-22 15:59

ישיר רצף שֶׁל מוצרי PCR . זה בהחלט אפשרי ישירות סדר פעולות א מוצר PCR מבלי לשבט קודם את הפרגמנט. ישיר רצף PCR רק לעתים נדירות מצליח אלא אם כן אתה להשקיע קצת זמן כדי להבטיח זאת אתה לא נופלים לתוך אחד מבין המלכודות הרבות.

באופן זה, מהו רצף PCR?

ישיר רצף שֶׁל PCR מוצרים. עליך להסיר הכל PCR פריימרים ונוקלאוטידים לא משולבים לפני המוצר ברצף . רצף משתמש רק בפריימר אחד במקום השניים שבהם נעשה שימוש PCR . אם לא תסיר את שני הפריימרים, תקבל שניים רצפים מוצבים אחד על השני שאינם ניתנים לקריאה.

באופן דומה, האם אני יכול להשתמש בפריימרים של PCR לביצוע רצף? פריימרים של PCR מיועדים ל PCR הגברה כדי להשיג אמפליקון. פריימרים לרצף הם בשימוש ל סדר פעולות קטע DNA ולחשוף את ה-DNA שלו סדר פעולות לזהות. 4. שניים פריימרים של PCR נחוצים בא PCR תגובה (בדרך כלל); רק אחד פריימר לרצף נוסף על א רצף תְגוּבָה.

בהתחשב בכך, איך בודקים מוצרי PCR?

איתור וניתוח של מוצרי PCR . ה מוצר של א PCR צריך להיות קטע או שברי DNA באורך מוגדר. ניתן להשתמש בטכניקות רבות כדי לזהות רצפים מוגברים (ראה טבלה). הטכניקה הפשוטה והנפוצה ביותר היא אלקטרופורזה של מוצר PCR על ג'ל אגרוז עם EtBr (אתידיום ברומיד).

מדוע יש צורך לטהר מוצרי PCR לפני ביצוע הרצף?

טָהֳרָה של DNA מא PCR התגובה היא בדרך כלל הכרחי עבור שימוש במורד הזרם, ומקל על הסרת אנזימים, נוקלאוטידים, פריימרים ורכיבי חיץ.