למה שאנזים הגבלה לא יחתוך?

2024 מְחַבֵּר: Stanley Ellington | [email protected]. שונה לאחרונה: 2023-12-16 00:17

יכולות להיות מספר סיבות שונות מדוע שלך אנזים הגבלה אינו חותך ה-DNA כפי שנסקר בסרטון זה. הכנת ה-DNA לביקוע צריך להיות נקי ממזהמים כגון פנול, כלורופורם, אלכוהול, EDTA, חומרי ניקוי או מלחים מוגזמים, שכולם יכולים להפריע אנזים הגבלה פעילות.

בהקשר זה, מדוע אנזימי ההגבלה אינם חותכים DNA חיידקי?

בַּקטֶרִיָה יש אנזימי הגבלה , המכונה גם אנדונוקליזות הגבלה , איזה גזירה סטנדרטים כפולים DNA בנקודות ספציפיות לתוך שברים. מעניין, אנזימי הגבלה אל תבקע את שלהם DNA . בַּקטֶרִיָה למנוע את שלהם DNA מ chop down by אנזים הגבלה באמצעות מתילציה של הַגבָּלָה אתרים.

אפשר גם לשאול, היכן חותכים אנזימי הגבלה? אנזים הגבלה סוגים בדרך כלל, סוג I אנזימים לחתוך DNA במקומות מרוחקים מרצף הזיהוי; סוג II גזירה DNA בתוך או קרוב לרצף הזיהוי; סוג III גזירה DNA ליד רצפי זיהוי; וסוג IV מבקעים DNA מתיל.

באופן דומה, נשאל, מה קורה אם מוסיפים יותר מדי אנזים הגבלה?

עיכול לא שלם עלול להתרחש כאשר יותר מדי אוֹ גַם קטן אֶנזִים משמש. ה נוכחות של מזהמים ב ה דגימת DNA פחית לעכב האנזימים , וכתוצאה מכך גם לעיכול לא שלם. כמה אנזימי הגבלה דורשים גורמים משותפים לפעילות מלאה.

למה תקציר ההגבלה שלי לא עובד?

לא שלם או לא אִכּוּל עקב פעילות האנזים שנחסמה על ידי מתילציה של DNA. אם האנזים שלך פעיל ו מעכל את לשלוט ב-DNA ו ה התגובה מוגדרת תוך שימוש בתנאים אופטימליים, אבל אתה עדיין רואה נושאים עם אִכּוּל , יכול להיות שזה בגלל ה האנזים מעוכב על ידי מתילציה של ה תבנית DNA.