האם ניתן להשבית את BamHI בחום?

2024 מְחַבֵּר: Stanley Ellington | [email protected]. שונה לאחרונה: 2023-12-16 00:17

למרות NdeI פחית לִהיוֹת חום מושבת , BamHI -HF לא יכול.

בדרך זו, איך מבטלים את BamHI?

חוֹם אִיוּן פְּעוּלָה בוצע באופן הבא כדי להעריך ניסוי טיפוסי. תערובת תגובה של 50 μl המכילה את ה-NEBuffer המתאים, 0.5 μg של DNA של התימוס של העגל ו-5 או 10 μl של אנדונוקלאז הגבלה (בריכוז מכירה) הודגרה ב-37°C למשך 60 דקות ולאחר מכן ב-65°C או 80°C עבור 20 דקות.

באופן דומה, מהו אתר ההגבלה של BamHI? BamHI . הַגבָּלָה אנדונוקלאז BamH I נקשר ל-DNA לא ספציפי. BamH I (מ-Bacillus amyloliquefaciens) הוא סוג II הַגבָּלָה אנדונוקלאז, בעל יכולת לזהות רצפים קצרים (6 b.p.) של DNA ולבקע אותם באופן ספציפי למטרה אֲתַר.

בהקשר זה, האם אני צריך לחמם את אנזים ההגבלה לנטרל?

אִיוּן פְּעוּלָה שֶׁל הַגבָּלָה אנדונוקלאזים בדרך כלל לא נחוץ , אך במקרים מסוימים זה עשוי להגביר את יעילות הטרנספורמציה.

מהי אי הפעלת חום?

חוֹם - אִיוּן פְּעוּלָה ( הַסָקָה ל-56 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות) נעשה כדי לבטל משלים, קבוצה של חלבונים הנמצאים בסרה שהם חלק מהתגובה החיסונית. חוֹם שימש גם להשמדת מיקופלזמה בסרום.