מהי מטרת השימוש ב-ddNTPs?

2024 מְחַבֵּר: Stanley Ellington | [email protected]. שונה לאחרונה: 2023-12-16 00:17

DdNTP מתייחס ל דידואוקסינוקלאוטידים טריפוספטים המשמשים בשיטת Sanger dideoxy לייצור אורכים שונים של גדילי DNA לרצף DNA. זה גורם להפסקת תהליך פילמור ה-DNA (או התארכות ה-DNA), מכיוון שתהליך זה זקוק לקבוצת 3'-OH כדי להמשיך.

מזה, מדוע משתמשים ב-ddNTP ברצף?

דידואוקסינוקלאוטידים הם מעכבי הארכת שרשרת של DNA פולימראז, בשימוש בשיטת סנגר ל-DNA רצף . ל- dideoxyribonucleotides אין קבוצת הידרוקסיל 3', ומכאן שלא יכולה להתרחש התארכות נוספת של השרשרת ברגע שה- dideoxynucleotide זה נמצא על השרשרת. זה יכול להוביל להפסקת ה-DNA סדר פעולות.

באופן דומה, האם ddNTPs מתחברים ל-dNTPs? אחד או יותר מה dNTPs מסומנים באופן רדיואקטיבי כדי לעזור לדמיין את תוצרי השכפול. לבסוף, כל צינור מקבל אחד מארבעה נוקלאוטידים מיוחדים הנקראים dideoxynucleotides ( ddNTPs ). עם זאת, לאחר שילוב, DNA פולימראז לא יכול להאריך עוד יותר את השרשרת מכיוון שהוא צריך 3'-OH כדי לְצַרֵף לנוקלאוטיד הבא.

באופן דומה אפשר לשאול, איך ddNTPs עוצרים תגובת רצף?

כאשר קיים בכמויות קטנות ב רצף תגובות , טריפוספטים של דידיאוקסיריבונוקלאוזיד ( ddNTPs ) להפסיק את תגובת רצף במיקומים שונים בגדילי ה-DNA הגדלים. ddNTPs עוצרים תגובת רצף כי הם: גורמים ל-DNA פולימראז ליפול מגדיל התבנית. ג.

באיזו טכניקה המערבת דידאוקסינוקלאוטידים ניתן להשתמש?

רצף סנגר הוא א שיטה של רצף DNA המבוסס על שילוב סלקטיבי של מסיימת שרשרת dideoxynucleotides על ידי DNA פולימראז במהלך שכפול DNA במבחנה. פותח על ידי פרדריק סנגר ועמיתיו ב-1977, זה היה הנפוץ ביותר בשימוש רצף שיטה במשך כ-40 שנה.